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在艾欧的帮助下，由艾欧负责向培养液输入阴遁查克拉，鸣人用移液枪滴入恐惧激素，二者融合在一起，阴遁查克拉的性质也发生了奇特的变化，化为一种特殊的查克拉。
在这种查克拉的作用下，泡在培养液中的眼球陡然间瞳孔扩散，原本瞳孔的位置被红色环装条纹取代，条纹上出现了勾玉图形。
单勾玉写轮眼开眼成功！
鸣人的实验设计不能说绝对的严谨和完美，但也算是歪打正着，恰好满足了写轮眼开眼的充要条件。
根据千手柱间的说法，当宇智波族人理解到“爱”的真谛后又失去时，“爱”的情感就会转变成更强大的憎恨。
就是说，当宇智波一族明白了“爱”失去的痛苦后，一种特殊的查克拉会侵入他们的大脑，让神经有规律的生长，导致他们眼睛的异变。
这种特殊的查克拉，是一种阴遁查克拉的变体，是阴遁查克拉和杏仁核分泌的情绪激素发生生物化学变化而产生的。
人的情绪来自于大脑的杏仁核，切除了杏仁核的人不存在任何情绪，当然也不会感受到爱和恨，杏仁核使人产生情绪的原理，则是分泌特殊的生物信息素，也就是鸣人用生化脑制备的“恐惧激素”。
阴遁查克拉和恐惧激素结合，刺激了宇智波一族眼球神经，引起了“开眼”的生理变化。
鸣人稍稍松了口气，实验终于取得了突破性进展，成功地将一颗携带宇智波基因的普通眼球开眼。
但这也只是最终目标的第一步，接下来还要继续研究，如何使单勾玉写轮眼进一步进阶，最终升级为万花筒写轮眼。
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